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双向电泳送样要求

日期:2019-09-19 08:54
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摘要: 双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1 000个E.coli蛋白,并表明蛋白质谱不是稳定的,而是随环境而变化. 双向电泳原理简明,**项进行等电聚焦,蛋白质沿pH梯度分离,至各自的等电点;随后,再沿垂直的方向进行分子量的分离。 1、 样品新鲜。 ...
     双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1 000个E.coli蛋白,并表明蛋白质谱不是稳定的,而是随环境而变化. 双向电泳原理简明,**项进行等电聚焦,蛋白质沿pH梯度分离,至各自的等电点;随后,再沿垂直的方向进行分子量的分离。
      1、 样品新鲜。
      说明:组织样本及细胞采样后应立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂,运输过程中血液、血清样品4℃保存,其它样品-20℃保存,不超过48小时(若外地邮寄,除血液、血清及细胞外请用干冰)。
2、 样品蛋白的总量不少于1mg。
说明:组织样本每份约250-500mg;
细胞样品每份106—107细胞数(一块胶);
血液、血清等样品大于5mL,且不能溶血;
蛋白提取物要求蛋白浓度大于5mg/mL,总量不少于1mg,且均匀无沉淀,样品中无盐成分;
植物或**样品量湿重不少于2g;
富含杂质或蛋白质含量低的样品量湿重不少于3g   。
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